Что такое анализ темного поля?
Кровь — удивительное творение природы. Без преувеличения можно сказать, что кровь является источником жизни: через кровь организм получает кислород и питательные вещества; с кровью из клеток уносятся «отходы производства»; и любой недуг обязательно находит свое отражение в крови — на этом выстроен целый ряд диагностических методик.
Кровь стала одной из первых жидкостей, которую любопытные исследователи поместили под объектив только что изобретенного микроскопа. Более 300 лет глаза медиков по‑прежнему смотрят на кровь через окуляры микроскопа.
Анализ темного поля — это метод клеточной морфологической микроскопии, который позволяет проводить подробный анализ образцов крови.
Анализ темного поля: все, что вам нужно знать
Анализ темного поля — техника, использующая тест ГЛБО для обнаружения микроорганизмов, которые могут быть причиной некоторых заболеваний. Прозрачные части элементов кажутся темными, а те, которые отображаются, имеют яркий внешний вид. За свою степень эффективности, анализ темного поля получил широкое распространение.
Техника заключается в использовании очень мощного света, который дифрагирует при воздействии на освещаемый объект (кровь), дает возможность наблюдать объект на темном фоне. Как вы уже и догадались, отсюда происходит название данного метода микроскопии.
Для проведения анализа темного поля необходим специальный микроскоп, позволяющий рассеивать световые лучи по образцам крови. Благодаря контрасту, кровь рассматривается более точно. Кроме того, метод позволяет удерживать и анализировать кровь гораздо дольше, не имея проблем с ее разложением. Остальные микроскопы не сохраняют кровь.
Как происходит анализ темного поля?
Берут два образца из одного пальца: первый образец резервируют для коагуляции. В одном случае наблюдается свежая кровь, а к образцу, в котором кровь уже коагулирована, применяется тест HLBO. Результаты обоих образцов позволяют определить состояние пациента и возможные заболевания. Основной же целью анализа темного поля является предотвращение возникновения заболеваний.
Метод позволяет получить четкий и подробный отчет по образцу крови. Он очень полезен для выявления случаев анемии, изжоги, паразитов, иммунных проблем, холестерина, клеточного окисления, недостатка оксигенации и многого другого.
Короче говоря, мы можем сделать вывод, что это очень эффективная альтернатива, которая позволяет нам получить доступ к более полному и подробному анализу, выходящему за пределы возможностей других более традиционных методов.
Нидерландский физик Фриц Цернике — в 1930-х годах заметил, что ускорение прохождения света по прямой делает изображение более детальным, выделяя отдельные элементы на светлом фоне. Для создания интерференции в образце, Цернике придумал систему колец в объективе и в конденсаторе микроскопа. При правильной настройке (юстировании) микроскопа, волны, идущие от источника света, будут попадать в глаз с определенным смещением по фазе, что позволяет значительно улучшить изображение изучаемого объекта.
Метод получил название фазово-контрастной микроскопии. Он оказался настолько прогрессивным, что в 1953 году Цернику присудили Нобелевскую премию по физике. Суть фазово-контрастного микроскопа состоит в том, что изучаемые под микроскопом ткани теперь не нужно стало окрашивать различными реактивами. Живые клетки, которые раньше просто убивались химикатами, теперь стали доступны для изучения в живом состоянии. Изобретение Цернике открыло науке новое направление — прижизненное микроскопирование.
Тестирование по «живой капле крови» зародилось в США в 1970-х годах.
В XXI веке биологические и медицинские микроскопы стали цифровыми, способными работать в разных режимах, в том числе и в темном поле (когда объект выглядит очень светлым на темном фоне), а также в поляризованном свете, позволяя выявлять объекты, лежащие за пределами обычного оптического разрешения.
Такая ткань как кровь, имеет малое количество клеток, но большое содержание «наполнителя», называемого промежуточным веществом. Клетки крови делятся на три большие группы
- Красные кровяные клетки (эритроциты) — являются переносчиками кислорода и углекислого газа, содержат в себе гемоглобин.
- Белые кровяные клетки (лейкоциты) — обеспечивают защиту организма от внешних и внутренних напастей (иммунитет).
- Кровяные пластинки (тромбоциты) — это «осколки» гигантских клеток костного мозга, которые обеспечивают свертываемость крови.
Жидкая часть крови называется плазмой. В состав плазмы входят органические и неорганические вещества и соединения, от ионов натрия и хлора до витаминов и гормонов. Из плазмы крови образуются все остальные жидкости организма.
Другие названия метода темного поля:
- «Диагностика по живой капле крови»
- «Тестирование на темнопольном микроскопе»
- «Гемосканирование»
Берут каплю крови, не окрашивают, не фиксируют, наносят на предметное стекло и изучают, просматривая образец на экране монитора. По результатам исследования ставят диагнозы и назначают лечение.
Правильно говорится — лучше один раз увидеть. Действительно под микроскопом можно обнаружить массу признаков тех или иных заболеваний, но заниматься этим должны сертифицированные и дипломированные специалисты. Скажите, давно вы любовались клетками родной любимой крови? Для того, чтобы правильно интерпретировать увиденное, нужна специальная подготовка, опыт работы с образцами крови — сотни просмотренных «стекол» как в обычном поле, так и в темном.
Изменение формы эритроцитов бывает при серповидноклеточной анемии. Под микроскопом можно увидеть внутриклеточных паразитов, бартонеллами называются. Есть только два паразита, жизненный цикл которых связан с эритроцитом — бартонелла и 4 вида плазмодиев, вызывающих различные типы малярии. И даже яйца гельминтов в крови теоретически обнаружить можно.
Чисто теоретически, если в крови под микроскопом будет обнаружен такой гигант мира бактерий, как кишечная палочка (1−3 мкм длиной и 0,5−0,8 мкм шириной), это будет означать только одно: у пациента сепсис, заражение крови. И он должен лежать горизонтально с температурой под 40 и прочими признаками тяжелейшего состояния. Потому что в норме кровь стерильна. Это одна из основных биологических констант, которая проверяется достаточно просто — посевом крови на различные питательные среды.
Микробиологам приходится сеять возбудителей различных болезней на специальные питательные среды, чтобы потом можно было точно сказать, кто вырос и к каким антибиотикам чувствителен.
Вот чего нельзя увидеть в микроскоп, так это pH крови, дефицит ферментов для расщепления белков, уровень водно-солевого обмена, пищевые мутагенные/тератогенные токсины, поражение эритроцитов почечными токсинами/свободными радикалами, паразитов, грибы, бактерии, яйца глистов, цисты; активность, количество и качество иммунных клеток.